Chomo-CK ™는 살아있는 세포를 colorimetric method로 확인할 수 있는 제품입니다. 본 제품에 사용된WST-8은 Water soluble tetrazolium salt로 세포내의 Dehydrogenase가 생성한 NAD(P)H와 electron mediator와 반응하여 수용성의 주황색 formazan을 생성합니다. 생성된 수용성 formazan은 cell media에 별도의 처리없이 녹아 450 nm의 파장으로 측정하여 살아있는 세포를 확인 할 수 있습니다.
Chomo-CK™는 직접 세포에 처리할 수 있는 ready to use reagent로써 사용 전 준비 단계가 필요하지 않습니다. 또한 제품에 사용된 WST-8은 수용성 tetrazolium으로 생성하는 formazan도 수용성으로 반응 후 별도의 처리없이 바로 측정이 가능합니다. QuantiMax™는 기존 사용하는 방식인 MTT, XTT, MTS, WST-1 보다 높은 감도를 보이며 낮은 독성과 높은 안정성으로 오랜 시간 배양하는 실험에도 적용이 가능합니다.
 
<제품용도 및 적용분야>
- Cell viability, proliferation test
- Cytotoxicity test
 
<보관방법>
냉장 보관하며, 제조일로부터 1년간 활성의 변화없이 사용 가능 합니다. 빛에 장시간 노출 시 제품 성능의 저하 또는 background 값이 증가 될 가능성이 있으니 빛을 차단한 상태에서 보관하십시오.
 
<제품성분 및 보관조건>
냉장 보관하며, 제조일로부터 1년간 활성의 변화없이 사용 가능 합니다. 빛에 장시간 노출 시 제품 성능의 저하 또는 background 값이 증가 될 가능성이 있으니 빛을 차단한 상태에서 보관하십시오.
 
#CH-1000  1000 tests (5㎖ x 2)
#CH-3000  3000 tests (5㎖ x 6)
#CH-10000  10000 tests (25㎖ x 4)
 
<실험방법>
Background control: 실험에 사용되는 세포 배양 배지 100 ㎕와 Chomo-CK™ 10 ㎕를 반응시켜 background 값으로 측정합니다.
- General Assay
1) 배양한 세포를 5x104~1x105cells/ml의 density로 배양 배지를 이용하여 현탁합니다.
2) 96-well plate에 준비한 세포 현탁액을 100 ㎕ 분주합니다.
3) CO2 세포배양기에서 24~48시간 배양합니다.
4) Chomo-CK™ 10 ㎕를 각 well에 처리 후 30분 ~4시간 CO2 배양기에서 배양합니다.
5) 반응 후 흡광도를 측정하기 전 1분간 부드럽게 shaking합니다.
6) Micro plate reader로 450 nm에서 측정합니다.
 
- Cell proliferation & toxicity assay
1) 100 ㎕의 세포 현탁액 (~5x103cells/well)을 96-well cell culture plate에 분주 후 CO2 incubator에서 24시간 배양합니다.
2) 처리하고자 하는 물질을 다양한 농도로 10 ㎕ 분주합니다.
3) 물질이 반응하는 시간을 (e.g., 6, 12, 24, 48 hr) 적절히 나누어 배양합니다.
4) Chomo-CK™ 10 ㎕를 각 well에 분주합니다.
5) 30분~4시간 배양합니다.
6) Microplate reader를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정합니다.
]
- Note
1) 96-well plate format이 아닌 다른 크기의 배양 용기를 사용하시는 경우에는 cell medium의 1/10의 비율로 Chomo-CK™를 처리하시면 됩니다.
2) 세포와 Chomo-CK™의 반응 시간은 세포의 종류, 농도 등에 따라 차이가 생기므로 예비실험을 통해 세포의 수, 반응 시간을 최적화 하신 후 본 실험을 진행하십시오.
3) Chomo-CK™ 처리 후 흡광도 측정 시 bubble이 있으면 정확한 측정이 안될 수 있습니다. 측정 전 bubble을 제거해 주십시오.
4) 세포에 처리되는 물질이 reducing agent를 포함하는 경우 WST-8과 반응하여 formazan을 형성할 수 있습니다. Reducing agent를 사용하실 경우 실험 전 흡광도를 측정해 확인하십시오.